軟式內(nèi)鏡的低溫滅菌方法(手術(shù)剪和內(nèi)鏡等最常用的滅菌方法是)
1.手術(shù)剪和內(nèi)鏡等最常用的滅菌方法是
比較常用的有五種
（一）熱力滅菌法
熱力能破壞微生物的蛋白質(zhì)和核酸，使蛋白質(zhì)變性凝固，核酸解鏈崩裂，從而導致其死亡。
1.干熱滅菌法 常用焚燒、燒灼和干烤等方法。
(1)焚燒與燒灼 焚燒僅用于廢棄的被病原微生物污染的物品、垃圾、人及動物尸體等。燒灼用于微生物實驗室的接種環(huán)、金屬器械、試管口、瓶口等的滅菌。
(2)干烤 使用干烤箱滅菌，一般需加熱至160℃~170℃經(jīng)2h，可達到滅菌的目的。適用于玻璃器皿、瓷器、金屬物品等的滅菌。
2.濕熱消毒滅菌法
(1)巴氏消毒法 法國學者巴斯德創(chuàng)用而得名。主要以較低溫度殺滅病原菌或特定微生物，而使物品中不耐熱成分不被破壞。此法有兩種：一種方法是加熱61.1℃~62.8℃、30min；另一種方法是加熱71.7℃、15~30s?，F(xiàn)在人們多用后種方法對牛奶進行消毒。
(2)煮沸法 煮沸100℃、5~10min，可殺死細菌繁殖體。芽胞則需要煮沸1~2h。常用于注射器、食具與飲水的消毒。
(3)流通蒸氣法 用阿諾（Arnold）蒸鍋或普通蒸籠，加熱100℃、15~30min，可殺滅細菌的繁殖體。若將消毒后的物品放入37℃孵箱培養(yǎng)，使芽胞發(fā)育成繁殖體，次日再蒸一次，如此連續(xù)三次以上，可達到滅菌效果，這種方法稱為間歇滅菌法。常用于不耐高溫的物品，如糖類、血清和雞蛋培養(yǎng)基等的滅菌。
(4)高壓蒸氣滅菌法 是一種迅速而有效的滅菌方法。使用高壓蒸氣滅菌器，利用加熱產(chǎn)生蒸氣，隨著蒸氣壓力不斷增加，溫度隨之升高，通常壓力在103.4kPa（相當舊制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 ）時，器內(nèi)溫度可達121.3℃，維持15~30min，可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物。此法常用于一般培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)器械及敷料等耐濕和耐高溫物品的滅菌。
（二）紫外線與電離輻射
1.日光與紫外線 日光消毒是最簡單、經(jīng)濟的方法，將病人的被褥、衣服、書報等在日光下曝曬數(shù)小時，可殺死表面的大部分微生物。日光中殺菌的成份主要是紫外線。紫外線200~300nm時，具有殺菌作用，其中以265~266nm波長的紫外線殺菌力最強。紫外線的殺菌原理，主要是細菌DNA吸收紫外線后，一條鏈上相鄰的兩個嘧啶通過共價鍵結(jié)合形成二聚體，從而干擾了DNA的正常堿基配對，導致細菌死亡或變異。
紫紅外線能透過石英，但不能穿過一般玻璃或薄紙，因此，紫外線只適用于物體表面及空氣的消毒。例如手術(shù)室、嬰兒室、傳染病房、無菌制劑室、微生物接種室的空氣消毒。
2.電離輻射 X射線、γ射線和陰極射線等電離輻射，有較高的能量與穿透力，因而可產(chǎn)生較強的致死效應。其機制在于產(chǎn)生游離基，破壞DNA。此法常用于大量一次性醫(yī)用塑料制品的消毒；亦可用于中藥成藥和食品的消毒，而不破壞其化學成分和營養(yǎng)成分。
（三）超聲波
超聲波是不被人耳感受的高于 20千周/s的聲波。其殺菌機制主要是它通過水時發(fā)生空化作用，而破壞了細菌細胞質(zhì)的膠體狀體，使其胞膜、胞質(zhì)分離，胞壁及胞膜破碎致細菌繁殖體死亡。此法主要用于粉碎細胞，以提取細胞組分或制備抗原等。
（四）微波
是一種波長為 1mm到1m左右的電磁波，稱微波。它能穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質(zhì)，但不能穿透金屬表面。目前用于消毒的微波有2,450MHz與915MHz兩種，常用于檢驗室用品、非金屬器械、無菌病室的食品用具及其它用品的消毒。
（五）濾過除菌
濾過除菌是用濾菌器阻留過濾液體和氣體的細菌，以達到無菌的目的。濾菌器含有微細小孔，只允許液體或氣體通過，而大于孔徑的細菌等顆粒不能通過。常用濾菌器有蔡氏濾器、玻璃濾器、薄膜濾器及高效顆粒空氣濾器四種。主要用于不耐熱的血清、抗毒素、生物藥品以及空氣等的除菌。
2.軟式內(nèi)鏡清洗消毒流程
原發(fā)布者：吻心717
軟式內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)規(guī)范1 范圍本標準規(guī)定了軟式內(nèi)鏡清洗消毒相關(guān)的管理要求、基本條件、操作規(guī)程等內(nèi)容。本標準適用于開展軟式內(nèi)鏡診療工作的醫(yī)療機構(gòu)。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注時期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改單）適用于本文件。GB5749 生活飲用水衛(wèi)生標準WS/T311醫(yī)院隔離技術(shù)規(guī)范WS/T313醫(yī)務人員手衛(wèi)生規(guī)范GB 內(nèi)鏡清洗消毒機（2012發(fā)布）GB 醫(yī)用清洗劑標準（2012發(fā)布）GB 消毒技術(shù)規(guī)范（2012發(fā)布）3 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標準。3.1軟式內(nèi)鏡 flexibleendoscope用于疾病診斷、治療的可彎曲的內(nèi)鏡。3.2清洗cleaning使用含有醫(yī)用清洗劑的清洗用水，去除附著于軟式內(nèi)鏡的污染物的過程。3.3漂洗rinsing用流動水沖洗清洗后軟式內(nèi)鏡上殘留物的過程。3.4終末漂洗finalrinsing對消毒后的軟式內(nèi)鏡進行最終漂洗的過程。3.5內(nèi)鏡清洗消毒機,AER用于內(nèi)鏡復用處理，具有清洗與消毒功能的機器。3.6醫(yī)用清洗劑medicalcleaningagent用于醫(yī)療器械清洗，增強水的去污能力的化學制劑。4 管理要求4.1醫(yī)療機構(gòu)的管理要求4.1.1開展內(nèi)鏡診療工作的醫(yī)療機構(gòu)，宜按專業(yè)群分別建立集中的內(nèi)鏡診療中心（室）。4.1.2醫(yī)療機構(gòu)應將內(nèi)鏡清洗消毒工作納入醫(yī)療質(zhì)量管理，制定和完善內(nèi)鏡中心（室）醫(yī)院感染管理和內(nèi)鏡清洗消毒的各
3.內(nèi)鏡消毒效果監(jiān)測采樣方法有哪些
4.1消毒內(nèi)鏡采樣
4.1.1采樣方法：
4.1.1.1監(jiān)測采樣部位為內(nèi)鏡的內(nèi)腔面。
4.1.1.2 用無菌注射器抽取10ml含相應中和劑的緩沖液，從待檢內(nèi)鏡活檢口注入，用15ml無菌試管從活檢出口收集。及時送檢。
4.1.2 菌落計數(shù)：將送檢液用漩渦器充分振蕩，取0.5ml，加入2只直徑90mm無菌平皿，每個平皿分別加入已經(jīng)熔化的45℃-48℃營養(yǎng)瓊脂15ml-18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，于35℃培養(yǎng)48小時后計數(shù)。
4.1.3 計算：兩平皿平均菌落數(shù)*20
4.2滅菌內(nèi)鏡及附件
4.2.1腹腔鏡、宮腔鏡、膀胱鏡、關(guān)節(jié)鏡、腦室鏡等。
4.2.2 內(nèi)鏡附件：活檢鉗、細胞刷、切開刀、導絲、碎石器、網(wǎng)籃、造影導管、異物鉗等。
4.2.3采樣地點：生物安全柜、手術(shù)室、無菌室等。
4.2.4采樣方法：用無菌棉拭子涂抹后，剪去手接觸部分，放入10ml采樣液的試管中。及時送檢，2小時內(nèi)檢測
4.3致病菌檢測：將送檢液用漩渦器充分震蕩，取0.2ml分別接種90mm血平皿、中國蘭血平皿和SS平皿，均勻涂布，35℃培養(yǎng)48小時，觀察有無病菌生長。
4.4增菌：SCDLP（金葡、銅綠假單胞）、葡萄糖肉湯（乙型溶血性鏈球菌）、SF（亞硒酸鹽增菌液）、GN（志賀氏增菌液）、乳糖膽鹽發(fā)酵管。
4.5致病菌：金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌。
5. 結(jié)果判定
5.1消毒后的內(nèi)鏡合格標準為：細菌總數(shù)5.2滅菌后內(nèi)鏡合格標準為：無菌檢測合格。
5.3 內(nèi)鏡結(jié)構(gòu)復雜，關(guān)節(jié)多、孔道細長 （2--6英尺，直徑 幾毫米），
5.4.使用時， 易沾掛血液、黏液、組織、排泄物等。
5.5.胃鏡在應用后，可有105-1010cfu/mL的生物負載。
5.6.支氣管鏡在清洗前， 平均負載為6.4*104cfu/mL。
4.滅菌方法有哪些
1.干熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌：灼燒主要是用于接種工具滅菌，在火焰上灼燒即可達到徹底滅菌，火焰滅菌通常用于無菌操作中，將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反復通過火焰數(shù)次，利用火焰對管口等進行滅菌，阻止管口污染，作為無菌操作過程中的輔助滅菌手段。
1.2干烤滅菌：利用熱輻射及干熱空氣進行滅菌。一般將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷制品包裝后，均可在烤箱內(nèi)干熱滅菌。通常加熱至160℃，保溫2h可完全滅菌。但不宜超過170℃，玻璃量具易變形。降溫過速，驟冷易引起玻璃器皿炸裂。干熱滅菌時裝入干烤箱內(nèi)的物品切勿緊密，應有空隙，利于熱空氣流動，過密，致使溫度不均，部分物品滅菌不徹底。
2.濕熱滅菌法
通過加壓提高蒸汽溫度，用高壓蒸汽滅菌，穿透力強，溫度高，滅菌效果最好。
注意事項：1.完全排除高壓滅菌器內(nèi)的冷空氣。有冷空氣存在時，在同一表壓下所達到的溫度值要低，而冷空氣排出越少，溫度就低得越多。在高壓蒸汽滅菌時，為保證達到規(guī)定的溫度，必須將冷空氣完全排除。否則，雖然壓力達到，而溫度達不到規(guī)定的要求，滅菌就不徹底。
3.紫外線 殺菌譜廣，但穿透力弱，影響因素多，殺菌效能受到一定限制。
紫外線消毒效果與紫外線強度、照射時間、溫度與濕度等因素有關(guān)。
我國規(guī)定紫外燈照射強度距離1m處不低于70μw/cm2。一般紫外燈使用超過100h，則應更換。表面有塵土，降低滅菌效果。紫外燈殺菌的溫度以20~40℃，相對濕度40%~60%為宜。
5.什么叫滅菌
(1)加熱滅菌法 利用高溫來殺死微生物（超過最高生長溫度）的方法。
加熱滅菌的原理：當高溫作用于微生物時，首先引起細胞內(nèi)生理生化反應速率加快，機體內(nèi)對溫度敏感的物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核酸等，隨著溫度的增高而遭受不可逆的破壞，盡而導致細胞內(nèi)原生質(zhì)體的變化、酶結(jié)構(gòu)的破壞，從而使細胞失去了生活機能上的協(xié)調(diào)，停止了生長發(fā)育。隨著高溫的繼續(xù)作用，細胞內(nèi)原生質(zhì)便發(fā)生凝固，酶結(jié)構(gòu)完全破壞，活動消失，生化反應停止，滲透交換等新陳代謝活動消失，細胞死亡。
加熱滅菌可分干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類。 1）干熱滅菌 利用灼燒或干熱空氣滅菌而沒有飽和水蒸氣參加的滅菌法稱為干熱滅菌法。
由于干熱滅菌使用方便，方法簡單，故在生產(chǎn)上廣泛應用。如火焰滅菌法：直接利用火焰把微生物燒死，故又稱焚燒滅菌法。
采用此法滅菌既徹底又迅速，但只適用于金屬制的接種工具、試管口及污染物品等的處理。熱空氣滅菌法：即在電熱恒溫干燥箱中利用干熱空氣來滅菌。
2）濕熱滅菌 即利用蒸汽進行滅菌的方法。濕熱滅菌又分為高壓、常壓、間歇滅菌和巴氏滅菌4種。
①高壓蒸汽滅菌 由于高壓蒸汽具有較強的穿透力和較常壓高的溫度，能大大縮短滅菌時間，提高工作效率，加之蛋白質(zhì)在濕熱條件下容易變性，在熱蒸汽條件下，細菌的芽孢在120℃，經(jīng)20~30分鐘可全部被殺死。如滅菌材料體積較大，不易被穿透時，可將壓力增加到0.152兆帕，延長至1~2小時。
在高壓蒸汽滅菌中，滅菌溫度隨蒸汽壓力的增加而升高（圖2-6）。 圖2-6 高壓蒸汽滅菌鍋 在使用高壓滅菌鍋時，要完全排出鍋內(nèi)的空氣而以飽和蒸汽代之。
如果空氣不排除干凈，則鍋內(nèi)溫度將低于同樣壓力下由純飽和蒸汽產(chǎn)生的溫度，影響滅菌效果。 此法適用于各種耐熱物品的滅菌，如一般培養(yǎng)基、生理鹽水等各種溶液、玻璃器皿、工作服等。
所采用的蒸汽壓力與時間，應根據(jù)待滅菌物品的性質(zhì)、體積與容器類型等決定。 ②常壓蒸汽滅菌 這是采用自然壓力、100℃蒸汽進行滅菌的方法。
它設(shè)備簡單、成本低，當前使用最廣泛。只要砌一個爐灶，買1~2只大鍋，上面用磚和水泥砌成，也可用大鐵桶、木桶等，體積大小可自行決定，但不宜過大，以裝800~1500瓶為好。
設(shè)計常壓灶時應注意的問題：大小根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模來定，灶頂部最好制成拱圓形，這樣冷凝水可沿灶的內(nèi)壁下流而不會打濕棉塞；灶倉內(nèi)要有層架結(jié)構(gòu)，以便分層裝入滅菌物；灶上應安裝溫度計，可隨時觀察灶內(nèi)溫度的變化；因滅菌時間長，鍋內(nèi)水不夠蒸發(fā)，故容量大的灶要安裝加水裝置；灶倉的密閉程度要盡可能高，這樣既提高滅菌效果，又節(jié)省燃料。菇農(nóng)在生產(chǎn)中還常用一種小型蒸汽發(fā)生裝置，引出蒸汽后直接通到下邊用木條塹起、四周用多層塑料布密封的菌袋堆中進行常壓滅菌。
這種方法不用建灶，簡便省工（圖2-7）。常壓滅菌一般水燒開后保持8~10小時，悶一夜即可。
圖2-7 簡易常壓滅菌法 ③常壓間歇蒸汽滅菌法 這是利用常壓蒸汽反復幾次滅菌的方法。具體做法是將待滅菌物品放在鍋內(nèi)，100℃處理1小時左右，殺死微生物的營養(yǎng)細胞，讓其冷卻至30℃左右，此時芽胞會萌發(fā)，再以同樣方法加熱處理，反復3次，可達到滅菌目的。
該方法可用于不耐高溫的藥品、營養(yǎng)物、特殊培養(yǎng)基的滅菌。 ④低溫巴氏滅菌法 即在60~70℃下，經(jīng)一定時間，殺死有害微生物的方法。
適應于不耐高溫的物品消毒。有些培養(yǎng)基，在高溫下遭到破壞，用此法既可殺死致病微生物的營養(yǎng)體，又能使培養(yǎng)基的成分不致受到嚴重破壞。
食用菌生產(chǎn)中培養(yǎng)料堆積發(fā)酵工藝，就是利用這個原理殺死其中的病蟲、雜菌。 （2）過濾除菌法 又分液體過濾和空氣過濾兩種，就是采用機械的方法，設(shè)計一種濾孔比細菌還小的篩子，做成各種過濾器，通過機械過濾，只讓液體培養(yǎng)基或空氣從篩孔流出，各種微生物菌體則留在篩子上，從而達到除菌的目的。
這種方法適用于對熱不穩(wěn)定的體積小的液體培養(yǎng)基（如動物血清、蛋白質(zhì)、酶、維生素等）及氣體的滅菌。超凈工作臺的工作原理就是將帶菌空氣通過過濾滅菌形成無菌空氣，從風洞中吹出，來造成工作臺范圍的無菌狀態(tài)。
過濾滅菌的最大優(yōu)點是不破壞培養(yǎng)基中各種物質(zhì)的化學成分。常用的過濾器有用硅藻土制的、石棉制的、陶瓷土制的，也有用火棉膠、硝化纖維素濾膜制成的。
（3）輻射滅菌法 利用輻射產(chǎn)生的能量進行殺菌的方法稱輻射滅菌。輻射可分電離輻射和非電離輻射兩種，α-射線、β-射線、γ-射線、X-射線、中子和質(zhì)子、微波等屬電離輻射，紫外線、臭氧、日光為非電離輻射。
1）紫外線滅菌 紫外線殺菌的原理是利用紫外線的輻射作用。用燈管直接照射細菌使其發(fā)生光化學反應，將細菌細胞質(zhì)誘導形成胸腺嘧啶雙聚體，從而抑制DNA的復制而發(fā)生變性、致死。
另一方面，空氣在紫外線照射下產(chǎn)生的臭氧（O3），也具有一定的殺菌作用。紫外線的有效作用距離為1.2~2.0米。
紫外燈一般懸吊在接種室或培養(yǎng)室的上方，個數(shù)依房間大小而定，容1~2個人操作的接種室，安裝一個30瓦的紫外燈就可以了。在每次接種前，應將所需的器具一起放入接種室（箱）內(nèi)，然后打開紫外燈照射。
如果接種室體積較大，開燈照射2小時。
